生命科學研究中，精準的核酸與蛋白定量至關重要。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計憑借其獨特的熒光檢測原理，為核酸與蛋白定量提供了高靈敏度、高特異性且操作簡便的解決方案。

在生命科學研究的廣闊領域中，從基礎的基因表達研究、蛋白質功能探索，到前沿的基因治療、個性化醫療等應用，準確測定核酸與蛋白質的含量是開展各項實驗的基石。核酸作為遺傳信息的攜帶者，其濃度與純度的精確測定對于基因克隆、PCR 擴增、下一代測序（NGS）等技術的成功實施起著決定性作用；蛋白質則是生命活動的主要執行者，蛋白質定量是蛋白質組學研究、細胞生物學實驗以及生物制藥工藝開發中不可或缺的環節。傳統的核酸與蛋白定量方法，如紫外分光光度法，雖應用廣泛，但在靈敏度、特異性以及對復雜樣品的耐受性等方面存在一定局限性。隨著技術的不斷進步，熒光檢測技術因其卓越的靈敏度和特異性，逐漸成為核酸與蛋白定量的主流方法之一。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計作為該領域的先進儀器，以其創新的設計和出色的性能，為生命科學研究帶來了更為高效、精準的定量手段，在眾多研究場景中發揮著關鍵作用。

一、在核酸定量中的應用

（一）NGS文庫構建中的DNA含量測定

在下一代測序（NGS）技術流程中，準確測定文庫中DNA的含量是保證測序質量和數據準確性的關鍵步驟。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計能夠精確測定NGS文庫中dsDNA的濃度，為文庫的定量和均一化提供可靠依據。通過使用dsDNA高靈敏度試劑盒，可檢測文庫中低濃度的DNA片段，確保在文庫混合和測序過程中，每個文庫都能以合適的比例進行測序，避免因文庫濃度不準確導致的測序偏差和數據浪費。研究表明，使用博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計進行NGS文庫定量，能夠有效提高測序數據的均一性和覆蓋度，使測序結果更加準確可靠，為深入研究基因組結構和功能提供有力支持。

（二）PCR實驗中核酸濃度檢測

PCR（聚合酶鏈式反應）是生命科學研究中廣泛應用的技術，而準確的核酸模板濃度對于 PCR 反應的成功至關重要。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計可用于PCR實驗前對模板DNA或RNA的濃度測定。在常規PCR中，準確知道模板DNA的濃度，能夠優化PCR反應體系，調整引物、酶、dNTP等反應成分的用量，提高PCR擴增的效率和特異性，減少非特異性擴增產物的產生。在實時熒光定量PCR（qPCR）中，精確測定起始核酸模板的濃度是定量分析基因表達水平的基礎。通過使用博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計對RNA進行準確的定量，并將其逆轉錄為cDNA后，再進行qPCR分析，能夠更準確地反映基因的表達差異，為基因功能研究、疾病診斷等領域提供可靠的數據支持。

（三）不同類型核酸樣品的定量分析

博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計能夠對多種不同類型的核酸樣品進行特異性定量分析。除了常見的dsDNA和RNA，對于單鏈DNA（ssDNA）、微小RNA（miRNA）等特殊類型的核酸也能準確測定其濃度。在研究ssDNA病毒的基因組含量、核酸適配體的濃度，以及在miRNA相關的疾病診斷和功能研究中，博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計都發揮著重要作用。例如，在miRNA的定量分析中，使用專門的miRNA定量試劑盒，結合博清生物熒光計的高靈敏度和高特異性檢測能力，能夠準確測定樣品中低豐度的miRNA含量，為深入了解miRNA在細胞生理病理過程中的調控機制提供關鍵數據。

二、在蛋白定量中的應用

（一）蛋白質純化過程中的濃度監測

在蛋白質純化過程中，需要實時監測蛋白質的濃度，以評估純化效果和確定最佳的收集時間點。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計可方便快捷地對蛋白質純化過程中的各個餾分進行濃度測定。在親和層析、離子交換層析等純化方法中，通過檢測不同洗脫餾分中的蛋白質濃度，能夠準確判斷目標蛋白質的洗脫峰位置，從而收集到高純度、高濃度的目標蛋白質。同時，在蛋白質濃縮步驟中，使用博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計監測蛋白質濃度的變化，可確保蛋白質在濃縮過程中既達到所需的濃度，又避免因過度濃縮導致蛋白質聚集或變性，為后續的蛋白質結構與功能研究提供高質量的蛋白質樣品。

（二）細胞生物學研究中的蛋白質定量

在細胞生物學研究中，準確測定細胞內蛋白質的含量對于了解細胞的生理狀態、信號轉導途徑以及疾病發生機制等方面具有重要意義。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計可用于測定細胞裂解液中的蛋白質濃度，為細胞生物學實驗提供基礎數據。在研究細胞增殖、分化、凋亡等過程中蛋白質表達水平的變化時，通過對不同處理組細胞裂解液中的蛋白質進行定量分析，能夠直觀地反映出蛋白質表達量的差異，進而深入探究相關的分子機制。此外，在細胞轉染實驗中，準確測定轉染前后細胞內目的蛋白質的濃度，有助于評估轉染效率和目的基因的表達效果，為基因功能研究和基因治療等領域的實驗優化提供依據。

（三）蛋白質組學研究中的應用

蛋白質組學旨在全面研究生物體或細胞內所有蛋白質的表達、修飾、相互作用等信息。在蛋白質組學研究中，樣品的制備和蛋白質定量是關鍵環節。博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計能夠對蛋白質組學樣品中的蛋白質進行準確的定量，為后續的蛋白質分離、鑒定和分析提供可靠的起始數據。在二維凝膠電泳（2-DE）實驗前，使用博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計對蛋白質樣品進行定量，可確保在凝膠上加載相同量的蛋白質，使不同樣品之間的蛋白質表達差異能夠準確地反映在凝膠圖譜上，便于后續的蛋白質點分析和鑒定。在基于質譜的蛋白質組學研究中，準確的蛋白質定量有助于優化質譜分析條件，提高蛋白質鑒定的準確性和靈敏度，從而更全面地揭示蛋白質組的組成和功能。

三、實驗數據對比

（一）與傳統紫外分光光度法的對比

為了進一步驗證博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計在核酸與蛋白定量方面的優勢，進行了與傳統紫外分光光度法的對比實驗。在核酸定量實驗中，選取一系列不同濃度的dsDNA樣品，分別使用博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計（搭配dsDNA高靈敏度試劑盒）和紫外分光光度計進行濃度測定。結果顯示，對于低濃度（＜10ng/ml）的dsDNA樣品，紫外分光光度計的檢測結果誤差較大，變異系數（CV）可達20%以上，而博清生物熒光計的檢測結果變異系數小于5%，準確性和重復性明顯優于紫外分光光度計。在高濃度（＞500ng/ml）樣品檢測中，雖然兩者都能給出相對準確的結果，但博清生物熒光計的檢測速度更快，且不受樣品中雜質（如蛋白質、游離核苷酸等）的干擾。在蛋白質定量實驗中，以BSA為標準蛋白，制備不同濃度的蛋白質樣品，分別用博清生物熒光計（使用Portelite? Fluorimetric Protein Quantitation Kit）和傳統的Bradford法進行測定。結果表明，博清生物熒光計在低濃度（＜50μg/ml）蛋白質檢測中，靈敏度比Bradford法提高了約10倍，能夠檢測到更低濃度的蛋白質，且檢測線性范圍更寬，能夠更準確地測定蛋白質濃度。

（二）不同品牌熒光計之間的性能對比

在同類熒光計性能對比實驗中，選取了市場上另一款知名品牌的熒光計與博清生物熒光計進行比較。在核酸檢測方面，對一系列不同類型和濃度的核酸樣品（包括dsDNA、ssDNA、RNA）進行檢測。結果顯示，博清生物熒光計在檢測靈敏度和特異性上與競品相當，但在檢測速度上具有明顯優勢，博清生物熒光計平均每個樣品的檢測時間為3秒，而競品需要5-7秒。在蛋白質檢測中，使用相同的蛋白質定量試劑盒對不同濃度的蛋白質樣品進行測定，博清生物熒光計的檢測線性范圍更寬，對于高濃度蛋白質樣品的檢測準確性更高，且在多次重復檢測中，博清生物熒光計的結果變異系數更小，穩定性更好。

博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計作為一款先進的生命科學研究工具，憑借其基于熒光檢測原理的獨特設計，在核酸與蛋白定量領域展現出高靈敏度、寬檢測范圍、高特異性、快速檢測以及樣品量需求少等諸多顯著優勢。在核酸定量方面，廣泛應用于NGS文庫構建、PCR實驗以及各種類型核酸樣品的分析，為基因組學研究提供了精準的數據支持；在蛋白定量中，在蛋白質純化、細胞生物學和蛋白質組學等研究領域發揮著關鍵作用，助力深入探究蛋白質的功能和作用機制。通過與傳統方法及同類產品的實驗數據對比，進一步凸顯了其在性能上的優越性。隨著生命科學研究的不斷深入和技術的持續發展，博清生物科技（南京）有限公司研發的熒光計有望在更多前沿研究領域，如單細胞分析、精準醫療等方面發揮更大的作用，為推動生命科學研究的進步做出重要貢獻，成為生命科學研究人員不可或缺的得力工具。